微核计数

微核试验自动化

基于 Metafer 的生物剂量学、毒理学和生物诱变学研究领域的体内微核和体外微核分析。

微核试验是定量分析 DNA 损伤的毒物筛选和辐射生物剂量学的重要指标,也被公认为是基因毒性致癌物测试中最为成功和可靠的试验。有两种主要微核试验模式:胞质阻断微核(体外微核)试验和哺乳动物红细胞微核(体内微核)试验。

Metafer 可以对以上两种试验实现完全无人值守的可靠准确的图像采集和分析。微核试验自动化分析完全遵从相应的 OECD 指南和标准实验室规范(Good Laboratory Practices ,GLP)。

体外微核试验

胞质阻断微核试验是衡量 DNA 损伤,白细胞郁滞和细胞毒性的综合系统。该试验首先在细胞培养物中加入细胞松弛素-B(有丝分裂纺锤体抑制剂,用于防止胞质分裂),因此细胞在完成细胞核分裂之后将继续保持双核的状态,然后对单次分裂的双核细胞分析DNA 损伤。

Metafer 自动扫描体外微核样本,准确的识别双核细胞(试剂处理后完成一次细胞核分离的细胞)并分析细胞中微核。同时为了给细胞的增值率提供资料,Metafer也会计算单核细胞中的微核。

分析结果展示在细胞缩略图中,每个细胞都会有相应的微核计数显示,总结的数据结果展示直方图中。用户可以任意选择微核阳性的细胞类别并在细胞缩略图中筛选出来,不需浏览所有细胞,能够快速检查自动分析的结果。另外用户能够更改细胞和微核形态的分析参数,也可以通过自动优化工具优化计数标准设定,同时自动优化也可以应用于选择最佳的图像处理参数。

Metafer 微核计数系统不仅十分稳定,而且极其快速。它已经成为辐射生物剂量学的重要分析工具。在不同的期刊论文中有多个独立的研究阐述了 Metafer 的微核计数系统是评估辐射剂量的实用工具,特别是可能涉及到电离放射源的大型事故发生时。

在毒理学中,需要通过单核、双核和多核细胞的比率计算胞质分裂增殖指数(Cytokinesis Block Proliferation Index, CBPI),此方法也是相应 OECD 指南的一部分(OECD 指南 #487)。Metafer 能够自动通过细胞核的形态参数分析细胞的状态并计算 CBPI,而且完全遵从相应的 OECD 指南和 GLP 管理体系标准。

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体内微核试验

体内微核试验( 啮齿类动物红细胞微核试验)的样本通常是经试验物质处理的啮齿类动物的骨髓或外周血样本。样本的红细胞分为嗜多染红细胞(Polychromatic Erythrocyte, PCE;未成熟红细胞)和嗜正染红细胞(Normochromatic Erythrocyte, NCE; 成熟红细胞)两类。在嗜多染红细胞 即 PCE 中,细胞核被压缩,而微核依旧存在于无核胞浆中。PCE 中微核频率的增多可以说明试验物质能够诱发染色体损伤。经过曙红亚甲基兰吉母萨染色的 PCE 和 NCE 可以通过颜色将它们区分,而且两种细胞的比例能够说明试验物质毒性能否导致细胞周期延迟。体内微核试验的样本首先要经过层析溶液纯化,同时也建议应用细胞离心涂片机准备样本。这样制备的样本确保了可靠无误的自动化分析。

Metafer 自动化体内微核试验可以完全实现无人值守。系统自动采集样本图像并分析染色深度范围,根据染色深度,自动将 PCE 和 NCE 通过颜色分类。同时系统能够灵活的识别不同着色深度 PCE 和 NCE 以及不同比例 PCE 和 NCE (如使用外周血代替骨髓)。当 PCE 和 NCE 的颜色确定后,系统会自动将每个细胞归类,并检测微核。正常情况下,系统每分钟至少可以扫描和分析 1000 个细胞。

Metafer 自动体内微核试验完全遵从相应的 OECD 指南(OECD 指南 #474)和 GLP 管理体系标准。

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